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實(shí)驗(yàn)科研者們往往對(duì)結(jié)果為關(guān)注，而因此忽略了細(xì)節(jié)問(wèn)題，但結(jié)果取決于細(xì)節(jié)！做實(shí)驗(yàn)，上海通蔚生物教您掌握ELISA試劑盒細(xì)節(jié)(供參考)。

根據(jù)采用的載體分為：

1.疏水性聚脂布作為載體；

2.聚苯乙烯微量板為載體；

3.硝酸纖維膜為載體。

ELISA是將酶催化的放大作用與特異性抗原抗體反應(yīng)結(jié)合起來(lái)的一種微量分析技術(shù)。酶標(biāo)記抗原或抗體以后，既不影響抗原抗體反應(yīng)的特異性，也不改變酶本身的活性。因?yàn)镋LISA試劑盒價(jià)格低廉且準(zhǔn)確性搞、反應(yīng)時(shí)間短等優(yōu)點(diǎn)，所以適合大批量的檢測(cè)，一般常常用于食品安全檢測(cè)方面。

ELISA需要遵循的幾個(gè)細(xì)節(jié)要點(diǎn)：

1.抗原或抗體能吸附于固相載體表面，并保持其免疫學(xué)活性；

2.抗原或抗體可通過(guò)共價(jià)鍵與酶連接形成酶結(jié)合物，而此種酶結(jié)合物仍能保持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性；

3.酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后，可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來(lái)判定是否有免疫反應(yīng)的存在，而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的，可根據(jù)已知濃度的抗原或抗體的顏色反應(yīng)的深淺繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)并依此計(jì)算出未知樣品中抗體或抗原的濃度。

注意事項(xiàng)：

1、標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)。如有細(xì)菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng)。保存過(guò)久可發(fā)生聚合在ELISA中可使本底加深。

2、凍結(jié)標(biāo)本溶解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應(yīng)充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下顛混合，不要在混勻器上強(qiáng)烈震蕩。

3、渾濁或有沉淀的標(biāo)本應(yīng)先離心或過(guò)濾，澄清后再檢測(cè)。

4、反復(fù)凍融會(huì)使蛋白效價(jià)降低，所以代測(cè)樣本如需保存作多次檢測(cè)，宜少量分裝冰存。

除了以上內(nèi)容，上海通蔚生物在ELISA試劑盒細(xì)節(jié)中，稀釋前、后的樣品必須充分混勻，所有試劑在加樣前也須搖勻，以保證試驗(yàn)的均一性。